技术原理

TMT (Tandem Mass Tag)

TMT试剂由三部分组成：质量报告基团、质量标准化基团和氨基反应基团。
        质量报告基团有10种不同的分子量，质量标准化基团也10有种不同的分子量，与不同的报告基团搭配，能保证被标记的不同来源的同一肽段在一级质谱中具有相同的质荷比；氨基反应基团能与肽段N端及赖氨酸侧链氨基发生共价连接使肽段连上标记。
        一级质谱中，任何一种TMT试剂标记的不同样品中的同一肽段表现出相同的质荷比；二级质谱中，可切割键（箭头所指）断裂释放出TMT报告离子，在质谱低质量区产生了10个TMT报告离子峰，其强度反应了该肽段在不同样品中的相对表达量信息，另外二级质谱中的肽段碎片离子峰质荷比反应了该肽段的序列信息；这些质谱原始数据经过数据库检索，可得到蛋白质的定性和相对定量信息。

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• 灵敏度高：低丰度蛋白也能检测出；
• 适用范围广：几乎可对任何物种的各类蛋白质进行分离鉴定；
• 高通量：能同时对10组样本中包含的蛋白进行鉴定及表达差异分析；
• **：液相色谱与串联质谱连用，自动化操作，分析速度快，分离效果好。

• 各种胁迫、生理、病理条件下细胞、组织样品中高通量蛋白表达谱分析
• 各种物种的蛋白质组草图的构建