一、用普通拉曼光谱仪对肿瘤细胞和正常细胞的光谱进行检测，我发现信号**被玻璃信号所掩盖。但是培养细胞的容器大都是玻璃的，请问各位高手，我该如何设计实验方案?

1.改变光路，从上往下照，而样品上面不要有石英或者玻璃，光直接打在样品溶液上。

2.使用流动泵，使激光打在液体的线上。没试过，但是我觉得这个方法不好。

二、我现在在为拉曼光谱仪进行波长校准说明书上说就用汞灯就可以 但是我却根本测量不出来峰 更不用说准确位置的峰了。

1.用以光谱校准的汞灯谱，*好与样品几乎同时测量，比如，刚刚测完样品后，或在测量样品之前。目的是为了减少光栅漂移造成的误差。

2.如果你能看到样品的谱线，按道理也应该能看到汞灯的谱线，只要汞灯放好在样品位置上，并且汞的谱线足够强。请检查光路是否校准。之前请确信：汞灯是否在你的测量范围有谱线。

3.如果你不是校准高于1500cm^-1的谱线，那么Fenchone是很好的拉曼标准样品。

三、碳中的两个峰：D-band 和G-band，这两个峰到底是什么意思啊，有的文献上说d peask是指disordered carbon， G peak是指graphitic carbon，而另有一些文献是以sp2原子的键来分，到底这两个是什么意思呢?

D峰是无序化峰(disorder)，D与G峰都是有sp2引起的。

1585cm−1左右的拉曼峰是体相晶态石墨的典型拉曼峰，称G带。此峰是石墨晶体的基本振动模式，其强度与晶体的尺寸有关。1360cm−1 处的拉曼峰源自石墨碳晶态边缘的振动，称为D 带。这两处拉曼峰为类石墨碳(如石墨，碳黑，活性碳等)的典型拉曼峰。

四、激光和FT拉曼的区别?

1.FT Raman可以减少荧光干扰这个说法没错。

2.你的研究目的是什么?FT Raman和激光显微Raman应用领域是有一定差别的。

3.一般说来，做有机或高分子研究用FT Raman多些，做材料研究用激光Raman多些。

4.另外，你还要注意选择合适的激发波长。

五、激光激发的拉曼谱线是高斯线型还是洛仑兹线型?是否与激光的线型有关?

1.来自于振荡的偶极矩的辐射，经典的电磁场理论可以证明Raman的峰是一个Lorentzian形状。但是实际上得到的Raman的峰是一个在Raman峰本身的形状，(natural lineshape),仪器的传输函数(instrumentaltransfer function)和无序诱发的振荡的分布(disorder-induceddistribution of vibrators)之间的卷积积分(convolution).它经常被认为是高斯或者Voigt函数(一个**的lorentzian和高斯函数的对称卷积)。

2.通常，晶体的峰用Lorentz解析，非晶的用Gaussian解析比较合适。

六、请问如何确定多壁碳纳米管拉曼光谱的 D'和G' lines 和 D+Gline 的位置?

D缝的位置应该是在1360cm-1左右，可能会有正负10左右的偏差，

G峰的位置应该是在1570cm-1左右，可能会有偏差的。

D+G也就是两个数相加，大概是在2930cm-1左右!

七、怎样计算拉曼光谱图形中的应力值?

用SIT质数计算就可以了

八、*近用氧化钨和氧化镓烧制合成了钨酸镓.测试了RAMAN谱后,在波数1400附近出现了强度很大的一个峰值,经过比较分析其不是氧化镓和氧化钨的的RAMAN峰,不确定是荧光干扰峰还是生成物钨酸镓的一个峰值。

换一个激发波长测同样范围,1400出现就可定性为拉曼信号.或测Anti-Stocks拉曼谱,-1400有对应信号也可证实其为拉曼信号.反之则为发光信号.

九、天然钻石及辐照处理钻石怎样用拉曼光谱鉴别?现在市场上很多深色钻石，如黄色、绿色等，与天然彩色钻石怎样区别?能用拉曼光谱区别否?

当然可以,这是在宝石行业的重要应用,天然钻石,作为**的单晶,si-si键单一尖锐的拉曼峰,(多少忘记了),而一些人工雕琢的宝石总会有这样那样的杂峰.

十、蓝移vs红移?

1.红移在物理学和天文学领域，指物体的电磁辐射由于某种原因波长增加的现象，在可见光波段，表现为光谱的谱线朝红端移动了一段距离，即波长变长、频率降低。相反的，波长变短、频率升高的现象则被称为蓝移

2.谱峰的“红移”和“蓝移”是指在分子光谱中生色团受与其相连的分子中其他部分的影响和溶剂的影响而使其吸收峰位置发生移动的现象，当吸收峰移向长波方向时就称为“红移”，移向短波方向时则称为“蓝移”。实际上这种现象不仅会发生在分子的电子能级跃迁过程中，而且也会发生在在分子的振动和转动能级的跃迁中，只不过在红外光谱中很**人这么叫。

在原子发射光谱中，因为原子线是由处于气态的激发态原子或离子产生的，所以其波长不会受原来分子中环境的影响，同样也不会受溶剂的影响，因此根本就不会存在分子光谱中的“红移”和“蓝移”现象。

十一、我要测水的Raman谱但是什么信号也没有，我用的是共聚焦Raman。我的激光功率加的不大，如果光太强热效应就非常明显了。那位高人给点意见?

1.不出意外，水峰应该很容易看到。主峰在3400cm^-1附近。非常强。

2.水的拉曼活性小,可以用SERS测

3.你聚焦的时候要保证聚到样品的表明就能测到，因为样品是透明的，想精确做到这一点很不容易，我用的是514的光源。

十二、要对Raman谱进行线宽分析，请教进行Lorentzian拟合?

使用origin软件里的analysis功能可对Raman谱进行高斯和洛伦兹拟合

十三、总看到文献上要算碳材料ID/IG的值，网上搜了半天只弄明白要用面积法算，origin能算么?

在origin里将基线拉平，基线位置数值为0。然后直接量取D峰的G峰的高度就OK。比值。我的见解。

十四、请问做raman时液体样品要怎么封?样品只能密封起来测，用玻璃毛细管据说不行 ，请问该怎么办?

1.用紫外可见的池子来测试。有一个teflon盖子。

2.拉曼对样品的前处理要求不是太高，只要液体不挥发就好，一般试剂瓶就可以.关键是光的影响.你可以自己作一个暗盒把试计瓶放在暗盒里进行实验

3.不会的啊,固体样品只要放到样品台上就可以了,液体样品只要遇热和光不挥发就可以直接放在玻璃管中测量了.如果挥发,那么就要用毛细管封起来就可以了啊,具体的我也不知道,不过我想应该是将毛细管用酒精喷灯拉封口的吧!

4.酒精灯烧一下就可以了。

5.毛细管即可，两头火机封住。如果样品信号太弱，可以用JY的转角镜头，信号可增强

6.用毛细管装液体样品测试时,可以用橡皮泥封口

7.有专门的拉曼滩头，我们测量固体时，隔着密封袋直接将滩头顶在被测物就可以了;液体有专门的样品池，但没有那么麻烦吧。

8.并不是所有的仪器都带这些配件的，有的只购买了核心部件，其他的都是自己配的。用毛细管应该是比较好的，很多人在用。蜡封就可以

十五、请问粉末样品的raman如何操作?

1.用的是什么样的光谱仪，很多都是有专用封闭式样品室，可以直接放置在里面对粉末样做检测的

2.粉末样品可以试着压片后进行测量，或是按你那方法，但是样品尽量厚一些，避免样品信号受下面背景影响。

十六、固体粉末样品，有毒，应该怎样处理?直接用双面胶粘到载波片上，可以吗?还是需要其他处理方法?

*好还是使用玻璃管封装起来测量!

十七、我是搞量化的，想通过拉曼来验证我计算的准确性。问了很多人：拉曼和红外的区别，他们大概的意思就是这2者之间的原理一样，只是波长不一样？

1.这两者都是振动光谱，从这一点上面来说，确实原理是一样的。但是红外是吸收光谱，而拉曼是散射光谱。

2.至于波长，拉曼采用的是激光作为激发源，波长范围可以从紫外-可见-红外都可以，*常见的是可见光和NIR的。而红外只能选择红外光作为光源，包括从远红外到近红外，平时*常用的是中红外，4000cm-1到400cm-1。

3.从选择法则上面来说，也就是什么样的振动是红外活性的，什么样的振动是拉曼活性的，也是不一样的。红外活性(也就是可以被红外检测到的振动)必须是分子偶极矩发生变化，而拉曼活性的振动必须是有分子的极化性发生改变才能被检测到。

4.从信号强度来说，拉曼的信号很弱，通常10的6次方-8次方才有一个拉曼散射的光子。而相对来说，红外的信号要强!所以在实际应用中，红外更广泛一些!

5.两者的光谱可以作为互补来确定分子的结构!

十八、拉曼光是激光作用到样品上立即产生的?还是经过一段延迟时间后产生的?

不是立即产生的,大概有一个飞秒(ps)级别的延迟.因为按照Raman产生的机理,入射光子与分子作用后,分子被激发并且形成一个短寿命的虚拟态,这个状态是不稳定的,光子很快重新发射.

十九、我现在测固体粉末的拉曼谱，**得不到拉曼谱线，只能看到很宽的轮廓线，将拉曼峰**湮灭了。刚才看到测近红外谱线需要先测一个参考谱，但测拉曼应该不需要吧?

1、你目前的问题是看不到样品信号，跟参考谱关系不大。当然，你应该用标准固体样品，比如硅(Si)试一下，如果你能够看到520.7波数那个峰，说明仪器的光路基本没有问题。

2、建议:

1) 调查一下，你的样品在观察波数范围内是否有拉曼峰;

2) 一边调整样品的位置(或者显微镜到样品的距离)，一边看是否有谱峰出现。对于共焦(confocal)拉曼反射式谱仪，调整样品的位置以获得*佳信号是很极其必要的。

二十、用激光粒度仪做固体样品时,应该怎样制备样品?

1.为使颗粒处于单体状态，在进行粒度测试前要对样品进行分散处理。分散的方法有润湿、搅拌、超声波振动、分散剂等，有时这些方法往往同时使用。

2.我们现在是用的磁力搅拌加分散剂的方法。发现测大颗粒的时候搅拌时间过长会影响粒径的大小。测出的结果偏小了

3.干样如果采用湿法分散测量粒度的话需要将样品放入装有溶剂(一般是水)的分散池中通过搅拌、超声等方式分散。而干样如果采用干法分散测量粒度的话可通过干法分散系统直接测量

二十一、*近学习拉曼光谱有一点不明白，拉曼光谱采用的是激光，不是单波长光吗，那谱图上怎么会有波长选择范围的呢?

1.激发光源用单色光-激光，没错。激发出的拉曼信号可能分布在一个很宽的范围内，即会同时激发出不同波长的拉曼信号。

2.个人理解:不同激发波长可能对样品峰的强度有选择性,但对于其波数位移影响不大.

3.

(1)激发光用的是单色的激光，如常用的488.0nm 514.5nm 785nm 1064nm，正因为激光的单色性好、准直性好、强度强等特点才用它

(2)“谱图上有波长选择范围”我不理解您的意思。由于不同的基团与激发光作用后产生不同的拉曼位移，这么频移有个范围，即一般拉曼信号在4000——200cm-1范围内

(3)使用不同的激发光源对于同一个基团而言，产生的拉曼位移位置不会变，只是强度不同而已。激发光源及其功率大小的选择要考虑

1)是否会损伤(烧掉、降解)样品 

2)能否得到拉曼信号，也就是拉曼信号强弱问题。如RRS就是从选择激发光源来增强拉曼信号的;另外还要避免荧光的干扰，可以用FT-Raman或使用Scissors(SSRS技术)。

二十二、请问什么样的样品需要用表面增强拉曼来测量，具体有没有一个标准?不同材料的表面增强剂要如何制作?

1.不知道你的表面增强剂指的是什么?你应该想说的是表面增强拉曼的表面吧?制备增强表面很容易,通常来说都是使用Ag, Au或者Cu来作为增强表面。什么样的样品?取决于你的实验目的了.没有固定的标准.

2.当待测物的浓度很低时就需要用到表面增强拉曼了。*常用的就是把银电极在氯化钾溶液里电化学粗糙处理，然后把电极浸泡在待测物溶液中吸附一段时间，*后取出电极冲洗干净就可以测了。

二十三、为什么金属没有Raman峰?

1.拉曼光谱是分子光谱，而金属都是原子结构的，所以金属没有拉曼光谱。

2.这个问题要看拉曼效应产生的原理了。金属中不存在分子的振动,当然就没有拉曼谱了.

3.很多原子构成的物质都有拉曼信号,比如硅的520波数线.拉曼测的是振动能级,声子能量,反映晶格振动的量子化能量的大小.金属表面电子和原子实构成的等离子体对光有强烈的吸收(金属的高反射性能也与此有关),使激光无法与内部原子作用,因此很难看到拉曼线.这是我根据自己已有知识的猜测,欢迎行内达人指正.

4.也可以用光的波矢k为虚数来解释，当k为虚数时，光不能在此物质中传播。当然和光的频率w有关，用其它波长的光激发可以激发拉曼谱。

二十四、告知我锰、镍、钴、钛的raman峰值区。

我查到的几个：

Mn-Mn(锰) ～180(弱)

Ni-Ni(镍)695～700

Co-Co(钴)463

二十五、RAMAN的强度受到哪些因素的影响?

1.浓度

2.还有激光的功率，以及你的测量的参数，尤其是光谱采集时间。

二十六、我做了一些拉曼的样品，但原始数据在orign中是一个斜线，上面有些小峰，和以前看到的拉曼的谱图差别很大，不知大家都是用什么样的软件来处理?

1.在origin软件里也可以处理出非常漂亮的拉曼图谱，斜线去基线和拉曼工作站软件处理原理差**。斜线去基线baseline

2.用Origin应当可以

3.在信号不太好的情况下是有点区别的，origin中出来的肯定没有拉曼软件中的好，可在origin中进行图形处理稍微优化

二十七、有没有专门扣除拉曼背底、平滑拉曼图的软件?

1.Thermo Galactic 的GRAMS/AI

2.GRAM、origin都可以做平滑，不过平滑时小心，很容易造成小峰丢失和峰位位移。

3.Jobin Yvon的拉曼测试软件Labspec就带了谱图处理功能，可以手工或自动拟合背景曲线做基线扣背景，还可以进行谱峰拟合分解。功能强大!

4.*好还是用与仪器相匹配的软件比较好。

5.Grams或者Origin，Labspec也可以，平滑的话可以试试S—G平滑，数据失真会小一些

二十八、傅立叶变换拉曼光谱与激光拉曼光谱有什么区别?

1.基本有以下几点：

(1)工作原理不一样

(2)傅立叶拉曼侧重于有机样品分析，用的是近红外激光器(1064nm)，能量较低信号弱。而色散型拉曼可选不同波长的激光器(200～800nm)，能量高，灵敏度高。

(3)使用傅立叶拉曼可减少样品的荧光干扰。

(4)傅立叶拉曼价格便宜

(5)现在基本买色散激光拉曼的用户较多。

2.傅立叶拉曼测水和黑色阳平效果不好，因为水和黑色样品对红外光的吸收都比较强，会导致本来就很弱的傅立叶拉曼信号会变的更弱

二十九、为什么荧光会影响raman谱?

1.拉曼测定的是分子受激发后的反射光，因此对于有些物资如无定型的物质玻璃等会在测定中产生强烈的荧光干扰，将拉曼信号掩盖。

现在对于荧光的消除一般是采用更换光源，通过改变激发波长避免荧光在测定的波数范围内出现。

2.有时候做拉曼的时候荧光背景较强，就需要改变激发波长来消除荧光影响的

三十、怎样用简单的方法判断拉曼光谱的光路有偏差，除了看信号差以外?

信号差是*简单，*明显的。如果是显微拉曼，那么激光照射样品并上下移动样品台，如果激光光斑一直是个均匀的同心圆并且发散聚拢均匀，那么激光光路就没有问题，反之则不好

信号光路看不到光，调起来复杂，只能根据信号来调

三十一、看到一些文献上当几个峰重合时，用到分峰技术，常用的是计算机去卷积，请问各位大侠，有什么软件或方法可以进行分峰处理?

1.在matlab中可以进行卷积和去卷积的计算，前提是你得稍微熟悉这些方法。

2.origin7.0可以，查一下说明书，按步骤来还是很简单的，没什么去卷积之类的

三十二、比如说我做了几种矿泉水样品的拉曼谱，发现出现一个未知的峰，我用什么方法知道这是什么物质呢?

1.Raman谱峰一般是重复性很好的.你所说的有是产生有时没有的峰,如果很锐利的话,应该就是宇宙峰了。

宇宙峰就是宇宙射线的影响产生的极其尖锐的峰，应当坚决去掉。好象一般在下午3点到7点的时候会经常出现这种影响，把它处理掉就行了。

宇宙射线，也称高能粒子流，是不经过光路，直接进入CCD的信号，一般仪器周围有强磁场等干扰源的时候会很强烈，别且在下午或傍晚比较强。这些粒子一般只会打到CCD的一个像元上，因此形成的峰会很锐并且不具有高斯或者洛伦茨线形，因此很容易辨认

2.做一下纯净水样品的测试，如果也在相同位置出现拉曼峰，则可归因于仪器本底或纯水的拉曼。另外可查一查纯水以及你*怀疑的矿物质的拉曼信息。

3.算出吸收谱的能量，查手册